摘 要:目的：植物多糖具有调节结肠菌群的作用，不同来源多的活性差异显著，可能受分子组成、连接方式和分子量大小的影响。本实验以健康人体肠道菌群为模型菌，在体外模拟结肠发酵，研究不同单糖组成植物多糖对肠道菌群结构的影响，并初步阐述其作用机制。  

方法：用食物胶固定健康人体粪便细菌，用模拟结肠培养基进行厌氧发酵，设如下两个发酵体系：（1）植物源多糖产品 ①空白、②菊粉（阳性对照）、③s01、④s02、⑤s03，加入糖样0.05g（2）植物源多糖单体 ①空白、②菊粉（阳性对照）、③s04、④s05、⑤s06、 ⑥s07、 ⑦s08，在24h取样，测定菌群结构（荧光原位杂交-流式细胞术）、pH值和产气量；在24h取样，检测短链脂肪酸含量. 

 结果：1）s01、s02、s03均能有效促进乳酸菌和双歧杆菌的增殖, s04-s08能有效促进拟杆菌的增殖 

2）发酵体系1：s01的乳酸、乙酸、丙酸、丁酸含量与菊粉的较接近，s02、s03的乳酸含量比菊粉的高。发酵体系2：s08的乳酸、乙酸、丙酸、丁酸酸含量与菊粉的相接近，s04、s05、s06、s07的丁酸的含量比菊粉的高。

3）线性相关分析显示：①产气量与乙酸存在显著负相关（r=-0.726；p=0.017）。② pH降低值与双歧杆菌（r=0.695,p=0.026）存在显著正相关，阿托波菌属存在显著正相关（r=0.706；p=0.023）。③双歧杆菌与梭球菌属存在显著正相关（r=0.883；p=0.001），与肠杆菌存在正相关（r=0.654；p=0.04），与阿托波菌属存在显著正相关（r=0.745；p=0.013），乳酸菌与阿托波菌属存在显著正相关（r=0.723；p=0.018）。④乙酸与乳酸存在显著负相关（r=-0.731；p=0.016），与丁酸存在显著正相关（r=0.731；p=0.016），丁酸与乳酸存在显著负相关（r=-0.675,p=0.032）。

4)以产气量、pH降低率、菌群构成及SCFA进行聚类分析，结果显示， s01、s02、s03的活性比较相似，其中s01和s02的活性最相似；s05和s06的活性比较相似，s04、s07和s08的活性比较相似。

关键词：植物多糖；肠道菌；体外发酵；荧光原位杂交；流式细胞术

目录

摘要

ABSTRACT

第1章 绪论-1

1.1植物多糖-1

1.1.1植物多糖的组成和结构-1

1.1.2植物多糖种类-1

1.1.3植物多糖的活性功能-1

1.2 肠道菌群-2

1.2.1 肠道菌群概述-3

1.2.2 肠道菌群的生理功能简介-3

1.3 短链脂肪酸-4

1.3.1 短链脂肪酸概述-4

1.3.2 SCFA 的生成-4

1.3.3 SCFA 的生理功能-4

1.4目前国内外的研究进展-5

1.5研究的目的和意义-5

1.6研究内容及技术路线-6

第2章材料与方法-7

2.1 实验材料-7

2.1.1 实验菌种-7

2.1.2 食源植物多糖-7

2.1.3试剂-7

2.1.4主要仪器和设备-9

2.1.5培养基的制备-9

2.1.6 菌悬液的制备-11

2.2 实验方法-11

2.2.1 定植胶粒的制备-11

2.2.2 体外模拟结肠发酵模型的建立-12

2.2.3 荧光原位杂交-12

第3章 结果与分析-17

3.1 不同组成食源植物多糖在发酵24小时后的产气量-17

3.1.1第一批植物多糖产品在发酵24小时后的产气量-17

3.1.2第二批食源植物多糖单体在发酵24小时后的产气量.-17

3.2不同组成食源植物多糖在发酵24小时后的pH降低率-18

3.2.1 第一批食源植物多糖产品在发酵24小时后的pH降低率-18

3.2.2第二批食源植物多糖单体在发酵24小时后的pH降低率-18

3.3 不同组成低聚糖发酵液中肠道菌群结构比较-19

3.3.1 第一批食源植物多糖产品在发酵24小时后菌群构成比例-19

3.3.2 第二批食源植物多糖单体在发酵24小时后菌群构成比例-19

3.3不同食源植物多糖发酵液中SCFA含量-20

3.4.1SCFA与产气量的相关性分析-20

3.4.1不同菌与pH降低率的相关性分析-21

3.3.3不同菌之间的相关性分析-22

3.3.4 SCFA之间的相互性分析-23

3.5 聚类分析-24

3.5.1第一批食源植物多糖（产品）的聚类分析-24

3.5.2第二批食源植物多糖的聚类分析-24

第4章 结论与展望-27

4.1 结论-27

4.2 不足及展望-27

参考文献-29

致  谢-31